研究目的
利用拉曼成像显微镜检测活癌细胞和组织中药物治疗诱导的代谢变化，重点研究FK866对IDH1突变细胞的影响。
研究成果
拉曼成像显微镜能有效检测癌细胞和组织的代谢变化，体外实验显示经FK866处理后脂质和蛋白质减少，但体内实验中脂质增加，这突显了其在药物追踪和代谢研究中的潜力，尽管存在灵敏度和特异性方面的局限。
研究不足
该技术对低药物浓度的检测灵敏度较低，且拉曼光谱中药物诱导的变化与组织信号存在重叠。由于肿瘤微环境中的代偿机制，在体疗效有限。
1：实验设计与方法选择：
本研究采用拉曼成像显微镜检测经NAD+补救途径抑制剂FK866处理的活细胞及组织的代谢变化。方法包括细胞培养、活力测定、拉曼光谱、核磁共振波谱、质谱分析以及小鼠体内模型。
2：样本选择与数据来源：
使用携带IDH1突变的人类癌细胞系（HT1080纤维肉瘤和BT142胶质瘤）。分析了颅内肿瘤小鼠的组织样本。
3：实验设备与材料清单：
设备包括DXR2xi拉曼显微镜、布鲁克Avance III 600 MHz核磁共振波谱仪、UPLC-QTOF-MS系统、细胞培养皿及FK866和AGI-5198等化学试剂。
4：实验流程与操作步骤：
细胞药物处理72小时后进行拉曼成像、核磁共振和质谱分析。小鼠经FK866处理后，在安乐死时采集组织进行分析。
5：数据分析方法：
拉曼数据使用OMNICxi软件处理，核磁共振谱图通过ACD Labs Spectrus Processor分析，质谱数据采用R Studio中的XCMS软件分析。
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Raman microscope
DXR2xi
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Acquiring Raman spectra for chemical mapping of cells and tissue
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NMR spectrometer
Avance III 600 MHz
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Acquiring 1H NMR spectra for lipid analysis
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Software
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ThermoFisher Scientific
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Acquity UPLC CSH 1.7 μm, 2.1 × 100 mm column
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Cell viability analyzer
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Beckman Coulter Inc.
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Microscope objective
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Olympus America Inc.
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Microscope objective
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Olympus America Inc.
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Software
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Controlling NMR spectrometer and data acquisition
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Software
ACD Labs Spectrus Processor
Advanced Chemistry Development Inc.
Processing and analyzing NMR spectra
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Software
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