研究目的
研究硅掺杂二氧化钛纳米管阵列对内皮细胞和巨噬细胞功能的协同效应及其相互作用以预防支架内再狭窄。
研究成果
TNA-Sis材料（尤其是硅含量较高的TNA-Si4）能显著增强内皮细胞功能，通过将巨噬细胞极化为M2表型来促进有利的免疫反应、减轻炎症并促进细胞间通讯，显示出预防冠状动脉支架内再狭窄的潜力。
研究不足
该研究仅限于使用细胞系的体外实验，可能无法完全复现体内条件；需要进一步的体内研究来确认这些发现对临床应用的适用性。
1：实验设计与方法选择：
通过磁控溅射Ti-Si涂层阳极氧化制备硅掺杂二氧化钛纳米管阵列（TNA-Sis），并采用多种生物学实验评估其对内皮细胞（ECs）和巨噬细胞（MΦs）的影响。
2：样本选择与数据来源：
以钛箔为基底，培养内皮细胞（EA.hy926细胞系）和巨噬细胞（RAW 264.7细胞系）。
3：7细胞系）。 实验设备与材料清单：
3. 实验设备与材料清单：设备包括直流磁控溅射系统、电源（IT6120，ITECH）、场发射扫描电镜（JSM-6700F，JEOL）、高分辨透射电镜（JEM-2100F，JEOL）、接触角分析仪（SL200B，Solon）、共聚焦激光扫描显微镜（C2 Plus，Nikon）、酶标仪、实时定量PCR仪（QuantStudio?，Applied Biosystems）。材料包括钛箔、硅片、乙二醇电解液、细胞培养基及检测试剂盒（如活死细胞染色试剂盒、LDH试剂盒、VEGF ELISA试剂盒）。
4：实验流程与操作步骤：
通过磁控溅射沉积Ti-Si涂层，经阳极氧化形成TNA-Sis，表征其形貌与性能后，用于细胞培养实验，包括细胞活性、迁移、NO与VEGF分泌、基因表达及细胞互作研究。
5：数据分析方法：
采用SPSS 14.0软件进行单因素方差分析及Student-Newman-Keuls检验；基因表达通过实时定量PCR及ΔΔCT法分析。
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FE-SEM
JSM-6700F
JEOL
Used for observing surface and cross-sectional morphology of specimens.
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HR-TEM
JEM-2100F
JEOL
Used for characterizing microstructure of specimens with selected area electron diffraction.
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RT-qPCR Instrument
QuantStudio?
Applied Biosystems
Used for real-time PCR to determine gene expression levels.
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Power Supply
IT6120
ITECH
Used for anodization process in the experimental setup.
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Contact Angle Analyzer
SL200B
Solon
Used for measuring static water contact angles to assess wettability.
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CLSM
C2 Plus
Nikon
Used for capturing images in cell viability assays.
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Microplate Reader
Used for measuring absorbance in assays such as LDH and VEGF ELISA.
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Live/Dead Viability Kit
Molecular Probes, Invitrogen
Used for quantifying adherent cell viability by staining live and dead cells.
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LDH Kit
Nanjing Jiancheng Biological Product
Used for determining lactate dehydrogenase release as a measure of cytotoxicity.
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VEGF ELISA Kit
Quantikine human VEGF Immunoassay kit
R&D Systems
Used for measuring VEGF secretion by endothelial cells.
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BCA Assay Kit
Sigma
Used for determining protein concentrations.
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SensiFAST? cDNA Synthesis Kit
Bioline
Used for synthesizing complementary DNA from RNA.
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SYBR Green qPCR Master Mix
Life Technologies
Used in real-time PCR for gene expression analysis.
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DAF-FM DA
4-Amino-5-Methylamino-2',7'-Difluorofluorescein Diacetate
Beyotime
Used as a nitric oxide fluorescence probe to measure NO production.
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