研究目的
开发一种组织学图像数字染色方法,利用高清红外成像实现细胞级分辨率,并借助光谱学的定量特性为病理检查提供可靠的组织表征。
研究成果
该方法成功利用中红外光谱和卷积神经网络重现高分辨率染色模式,其结果与传统组织病理学相似。通过卷积神经网络整合空间特征克服了衍射限制,从而更准确地复现染色模式。未来研究方向包括采用免疫组织化学染色或其他光谱对比机制,并进行广泛的临床验证。
研究不足
该方法要求输入图像与目标图像之间进行像素级对齐,但由于染色过程引入的畸变,这一要求具有挑战性。指纹区域的化学分辨率受衍射极限限制。未来的工作包括降低对齐要求并进行广泛的临床验证。
1:实验设计与方法选择:
本研究采用卷积神经网络(CNN)将傅里叶变换红外光谱(FTIR)图像映射为化学染色图像。该CNN利用空间和光谱特征来克服光谱指纹区的衍射限制。
2:样本选择与数据来源:
使用猪肾手术切除样本。样本经福尔马林固定和石蜡包埋(FFPE)处理,切成5微米薄片,并置于透红外光的氟化钙基底上。
3:实验设备与材料清单:
FTIR光谱显微镜(Cary 600,安捷伦科技)、光学显微镜(尼康)、氟化钙基底、二甲苯、乙醇、苏木精-伊红(H&E)染料。
4:实验流程与操作步骤:
在900至4000 cm?1范围内以4 cm?1光谱分辨率进行FTIR成像。FTIR成像后,切片用H&E化学染色并通过光学显微镜成像。使用GIMP软件手动对齐图像。数据预处理包括基线校正、波段归一化和主成分分析(PCA)降维。CNN训练使用16000个样本,每个像素周围的空间裁剪尺寸为9×9。
5:数据分析方法:
CNN训练采用均方误差(MSE)作为损失函数,结构相似性(SSIM)指数评估输出质量,PCA用于降维。
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Used for FTIR imaging of tissue samples in the range of 900 to 4000 cm?1 at 4 cm?1 spectral resolution.
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Used for training and testing the convolutional neural network (CNN).
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