研究目的
开发一种基于CdSe/SiO2量子点的快速灵敏横向流动检测方法,用于同时检测三种霉菌毒素(黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮和脱氧雪腐镰刀菌烯醇)。
研究成果
荧光侧向流动免疫分析法可在15分钟内同时定量检测黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮和脱氧雪腐镰刀菌烯醇。采用CdSe/SiO2量子点标记单克隆抗体作为信号探针,具有高特异性、高灵敏度和良好稳定性。该方法对实际样品的检测结果与液相色谱-串联质谱法具有良好的一致性。
研究不足
该方法的局限性在于,由于单克隆抗体与其类似物之间的交叉反应,可能导致真菌毒素的检测结果被高估。
1:实验设计与方法选择:
该方法基于使用平均直径为106纳米的CdSe/SiO2量子点微珠(QBs)。这些微珠具有强红色荧光(激发/发射峰值为365/622纳米),从而提高了灵敏度。将QBs与单克隆抗体(mAbs)结合作为信号探针,可分别与AFB1、ZEN和DON发生特异性反应。
2:ZEN和DON发生特异性反应。 样本选择与数据来源:
2. 样本选择与数据来源:由国家饲料工程技术研究中心提供的自然污染饲料样本,包括玉米、小麦、干酒糟、花生压榨粕、喷浆玉米皮和玉米胚芽粕。
3:实验设备与材料清单:
CdSe量子点微珠购自武汉嘉源量子点有限公司。免疫层析试纸条材料(包括样品垫、吸水垫、PVC板及硝酸纤维素(NC)膜)购自密理博公司。
4:实验步骤与操作流程:
将平均直径为106.3纳米的QBs溶解于去离子水中,浓度为1μM,4°C保存备用。通过将QBs-COOH与抗AFB1 mAbs、抗ZEN mAbs和抗DON mAbs偶联,合成了三种标记单克隆抗体的QBs。
5:3纳米的QBs溶解于去离子水中,浓度为1μM,4°C保存备用。通过将QBs-COOH与抗AFB1 mAbs、抗ZEN mAbs和抗DON mAbs偶联,合成了三种标记单克隆抗体的QBs。 数据分析方法:
5. 数据分析方法:使用荧光试纸条读取器测量T1线(黄曲霉毒素B1-牛血清白蛋白,FlT1)、T2线(玉米赤霉烯酮-牛血清白蛋白,FlT2)、T3线(脱氧雪腐镰刀菌烯醇-牛血清白蛋白,FlT3)和C线(对照线,FlC)上的荧光信号强度。
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