研究目的
开发一种基于共轭加成-环化-消除策略的新型比色和比率荧光探针，用于从生物样品中的同型半胱氨酸（Hcy）和谷胱甘肽（GSH）实时检测半胱氨酸（Cys）的高效方法。
研究成果
探针1通过比色和比率响应、大斯托克斯位移，能高灵敏度、高选择性检测半胱氨酸（Cys），并成功应用于活细胞成像，可有效区分Cys与同型半胱氨酸（Hcy）和谷胱甘肽（GSH）。
研究不足
该探针需要长达30分钟的反应时间才能完全响应；在高度复杂的生物环境或未测试的其他干扰物质中可能存在局限性。
1：实验设计与方法选择：
采用丙烯酸酯与对羟基苄基片段的共轭加成-环化-消除策略设计探针，通过紫外-可见光谱和荧光光谱进行检测。
2：样本选择与数据来源：
生物成像选用HeLa细胞；氨基酸及其他分析物在缓冲溶液中进行测试。
3：实验仪器与材料清单：
仪器包括布鲁克Avance-400核磁共振仪、LC-MS 6120质谱仪、赛默飞世尔Evolution 300紫外-可见分光光度计、日立F-4600荧光分光光度计、徕卡SP5共聚焦显微镜；试剂包含半胱氨酸（Cys）、高半胱氨酸（Hcy）、谷胱甘肽（GSH）、二甲基亚砜（DMSO）、磷酸盐缓冲液（PBS）。
4：实验流程与操作步骤：
探针1的合成，在PBS缓冲液（10 mM，水/DMSO 1:1，pH 7.4，25°C）中进行光谱测定，细胞培养及共聚焦显微镜成像。
5：4，25°C）中进行光谱测定，细胞培养及共聚焦显微镜成像。 数据分析方法：
5. 数据分析方法：计算荧光强度比值（F539 nm/F644 nm），按标准方法测定检测限。
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